معلومة

بوليميريز الحمض النووي أنا نشاط نوكلياز خارجي

بوليميريز الحمض النووي أنا نشاط نوكلياز خارجي



We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

هل يستخدم بوليميراز الحمض النووي I في البكتيريا نشاط نوكلياز خارجي أمامي أو عكسي لإزالة بادئات الحمض النووي الريبي؟ يقول أحد كتبي أنه يستخدم 5 'إلى 3' ، لكن آخر يقول أنه يستخدم 3 'إلى 5' نشاط نوكلياز خارجي.

تحديث: أعرف أن RNase H يمكنه إزالة البادئات ، لكن نشاط نوكلياز خارجي للبول يمكنني أيضًا إزالتها.


من ويكيبيديا:

في عملية النسخ المتماثل ، يقوم RNAse H بإزالة RNA التمهيدي (الذي تم إنشاؤه بواسطة Primase) من الشريط المتأخر ثم يقوم Polymerase I بملء النيوكليوتيدات اللازمة بين شظايا Okazaki (انظر تكرار الحمض النووي) في اتجاه 5 '-> 3' ...

وفي مكان آخر في نفس المقالة:

يمتلك Pol I أربعة أنشطة إنزيمية:

  1. نشاط بوليميريز الحمض النووي المعتمد على الحمض النووي 5 '-> 3' (أمامي) ، يتطلب موقعًا تمهيديًا 3 'وحبلا قالب
  2. نشاط نوكلياز خارجي 3 '-> 5' (عكسي) يتوسط في التدقيق اللغوي
  3. نشاط نوكلياز خارجي 5 '-> 3' (أمامي) يتوسط ترجمة نيك أثناء إصلاح الحمض النووي.
  4. نشاط بوليميريز DNA المعتمد على الحمض النووي الريبي 5 '-> 3' (أمامي). يعمل Pol I على قوالب RNA بكفاءة أقل بكثير (0.1-0.4٪) من قوالب الحمض النووي ، وربما يكون لهذا النشاط أهمية بيولوجية محدودة فقط.

لذا فإن إجابة سؤالك ليست كذلك. يزيل RNAse H البادئات ، ونشاط نوكلياز خارجي لـ DNA Pol I لا علاقة له بإزالة التمهيدي ، على الرغم من أنه يمكن أن يعمل في أي من الاتجاهين اعتمادًا على السياق.


أظهر سؤالك في Googling أن RNAse H هو الذي يزيل RNA التمهيدي. يحتوي DNA Pol I على نشاط نوكلياز خارجي 3'-5 'وكذلك 5'-3' لتصحيح التجارب المطبعية وأنشطة إصلاح النك ، على التوالي. انظر الويكي على Pol I


تعديل نشاط نوكلياز 3 '-> 5'-exonuclease للنوكلي الداخلي الأبوريني البشري (Ape1) بواسطة منتج DNA Abasic 5'-incised

نوكلياز الخلية البشرية الرئيسي ، بروتين Ape1 ، هو إنزيم متعدد الوظائف له دور حاسم في إصلاح استئصال القاعدة (BER) للحمض النووي. بالإضافة إلى نشاطه الأساسي باعتباره نوكليازًا داخليًا أبورينيًا / أبيريميدينيًا في BER ، يمتلك Ape1 أيضًا 3'-phosphodiesterase و 3'-phosphatase و 3 '- & gt5'-exonuclease وظائف محددة لـ 3' نهايات من النكات الداخلية والفجوات في الحمض النووي. يتم تحسين نشاط نوكلياز خارجي عند عدم تطابق 3 بوصات ، مما يشير إلى دور محتمل في BER لـ Ape1 كنشاط تدقيق لغوي لبيتا DNA polymerase غير الدقيق نسبيًا. لتوضيح هذا الدور بشكل أكثر دقة ، قمنا بالتحقيق في قدرة Ape1 على تحطيم ركائز الحمض النووي التي تحاكي وسيطة BER. وجدنا أن نوكلياز Ape1 يكون نشطًا في كلٍّ من نهايات 3 'غير المتطابقة والمطابقة بشكل صحيح ، مع تفضيل عدم التطابق. في أيدينا ، كان نشاط نوكلياز خارجي لـ Ape1 أكثر نشاطًا عند فجوات النوكليوتيدات الواحدة منه في النكات الموجودة في الحمض النووي ، على الرغم من أن الأخير يجب أن يمثل نتاجًا لتخليق الإصلاح بواسطة بوليميراز بيتا. ومع ذلك ، تم تثبيط نشاط نوكلياز خارجي بسبب وجود بقايا أصلية قريبة من 5'-شق ، والتي تنتج من نشاط نوكلياز أبوريني / أبيرميدينيك من Ape1. وينطبق الشيء نفسه على نشاط نوكلياز خارجي الموصوف حديثًا لنواة نوكلياز الإشريكية القولونية IV. نوكلياز III ، متماثل الإشريكية القولونية للقرد Ape1 ، لم يميز بين الركائز المختلفة. خففت إزالة 5 بقايا أسية بواسطة بوليميراز بيتا من تثبيط نشاط نوكلياز Ape1. تشير هذه النتائج إلى أدوار نوكلياز Ape1 الخارجي خلال BER بعد كل من تخليق إصلاح الحمض النووي واستئصال deoxyribose-5-phosphate الأساسي بواسطة polymerase beta.


ما هو نوكلياز داخلي

نوكلياز داخلية هي فئة من الهيدرولاز تشق الأحماض النووية في المنتصف. قد ينتج عن عمل نوكليازات داخلية جزئين أو أكثر من الأحماض النووية. نوكليازات داخلية قادرة على العمل على كل من DNA و RNA. انقسام بعض نوكليازات مثل ديوكسي ريبونوكلياز (DNases) غير محدد. ومع ذلك ، فإن العديد من نوكليازات تشق متواليات النيوكليوتيدات المستهدفة بطريقة معينة. يتم استدعاء هذا النوع من نوكليازات محددة نوكليازات تقييد. إنهم قادرون على التعرف على تسلسل محدد من حبلا الحمض النووي. وبالتالي ، تخضع نوكليازات التقييد هذه لفترة تأخر قبل عملها على الحمض النووي ، مما يؤدي إلى البحث عن تسلسل النيوكليوتيدات المحدد. يسمى تسلسل النوكليوتيدات المحدد بموقع التقييد.

الشكل 1: عمل هند الثالث

موقع التقييد النموذجي هو تسلسل متناوب من أربعة إلى ستة نيوكليوتيدات. العديد من نوكليازات التقييد تشق خيوط الحمض النووي ، تاركة نهايات مفردة الجديلة تسمى نهايات لزجة. في الهندسة الوراثية ، يتم استخدام هذا النوع من نوكليازات التقييد على نطاق واسع لإنتاج الحمض النووي المؤتلف عن طريق ربط خيوط DNA المختلفة المرغوبة معًا. مثيلة الحمض النووي في الكائنات الحية الأعلى تمنع عمل نوكليازات داخلية على جينومها. ومع ذلك ، فإن الحمض النووي بدائية النواة يفتقر إلى المثيلة. لذلك ، يمكن بسهولة استهداف الحمض النووي بدائية النواة داخل مضيف حقيقي النواة من أجل الانقسام. تشكيل الطرف اللاصق بفعل نوكلياز التقييد ، هينيظهر د الثالث في شكل 1.


إصدارات أخرى من هذه المقالة

بوليميريز الحمض النووي البكتيري الأول

بوليميريز الحمض النووي البكتيري الأول

كلية لندن الجامعية وبيركبيك ، معهد البيولوجيا الهيكلية والجزيئية ، لندن ، المملكة المتحدة

جامعة واشنطن ، سانت لويس ، ميزوري ، الولايات المتحدة الأمريكية

كلية لندن الجامعية وبيركبيك ، معهد البيولوجيا الهيكلية والجزيئية ، لندن ، المملكة المتحدة

كلية لندن الجامعية وبيركبيك ، معهد البيولوجيا الهيكلية والجزيئية ، لندن ، المملكة المتحدة

جامعة واشنطن ، سانت لويس ، ميزوري ، الولايات المتحدة الأمريكية

كلية لندن الجامعية وبيركبيك ، معهد البيولوجيا الهيكلية والجزيئية ، لندن ، المملكة المتحدة

الملخص

إن بوليميراز حمض الديوكسي ريبونوكلييك البكتيري (DNA) هو عائلة من الإنزيمات المشاركة في تخليق الحمض النووي البكتيري وإصلاح الآفات. تحتوي هذه الإنزيمات على بنية متعددة المجالات ، تتكون من سلسلة بولي ببتيد واحدة تشمل مجال بوليميريز متميز ، وتصحيح التجارب المطبعية 3′ –5 نوكلياز خارجي و / أو نشاط نوكلياز خارجي 5′ –3. تم فحص أعضاء عائلة البوليميراز I على نطاق واسع ، بسبب دورهم الحيوي في تكرار الكروموسومات البكتيرية والحفاظ عليها ، وبسبب أهميتها كأدوات في البيولوجيا الجزيئية ، ولا سيما في تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وتسلسل الحمض النووي. دراسات على الإشريكية القولونية لقد أسفر بوليميراز الحمض النووي I على وجه الخصوص عن رؤى مهمة حول آلية بلمرة الحمض النووي التي تشترك فيها جميع بوليميرات النوكليوتيدات الأخرى تقريبًا.

المفاهيم الرئيسية:

إنزيمات DNA polymerase I البكتيرية عبارة عن بروتينات متعددة المجالات مع بلمرة منفصلة ، وتصحيح التجارب المطبعية ووظائف نوكلياز خارجية 5 – 3.

يؤدون وظيفة حيوية في البكتيريا من خلال إجراء إصلاح الحمض النووي وبعض جوانب تكرار الكروموسومات.

تشتمل البوليميرات على نيوكليوتيد واحد في وقت واحد إلى نهاية 3 من خيط DNA التمهيدي بطريقة موجهة بالقالب.

يمكن لأفراد عائلة DNA polymerase I نسخ الحمض النووي بدقة أكبر بكثير مما يمكن أن يفسره الاقتران الأساسي وحده.

تفاعل البلمرة هو عملية متعددة الخطوات يقوم خلالها الإنزيم بالتبديل بين ربط الركيزة وتوافق دمج النيوكليوتيدات.

يسمح نوكلياز خارجي 5′ - 3 للبوليميراز بتحلل بادئات الحمض النووي الريبي (RNA) والمساعدة في إصلاح الحمض النووي.

تُستخدم بوليميرات الحمض النووي من العائلة I المقاومة للحرارة على نطاق واسع في تفاعل البلمرة المتسلسل لتضخيم الحمض النووي ولتسلسل الحمض النووي.


بوليميريز DNA جديد من Geobacillus caldoxylosilyticus TK4: الاستنساخ والتوصيف والتحليل الطفري لمتبقي عطري

تم استنساخ جين DNA polymerase I وتسلسله من البكتيريا المحبة للحرارة Geobacillus caldoxylosilyticus TK4. يبلغ طول الجين 2634 نقطة أساس ويشفر بروتينًا مكونًا من 878 حمضًا أمينيًا في الطول. يحتوي الإنزيم على كتلة جزيئية تبلغ 99 كيلو دالتون ويظهر التماثل المتسلسل مع بوليميريز الحمض النووي 1 من أنواع العصيات (هوية 89 ٪). تم التعبير عن الجين بشكل مفرط في الإشريكية القولونية وتم تمييز الإنزيم المنقى من الناحية الكيميائية الحيوية. يحتوي على جميع العناصر الهيكلية الأساسية اللازمة لبوليميراز الحمض النووي ونشاط نوكلياز خارجي 5 '- & gt 3' ، لكنه يفتقر إلى العناصر الزخرفية المطلوبة لنشاط نوكلياز خارجي 3 '- و 5'. أكدت فحوصات نوكلياز 5 'nuclease و 3' - & gt 5 'أن Gca polymerase I يحتوي على نشاط نوكلياز خارجي مزدوج السلسلة 5' - & GT 3 'ولكن ليس نشاط نوكلياز خارجي 3' - & GT 5 '. لوحظ أن نشاطه المحدد هو 495000 U / mg بروتين ، و K (D) (DNA) ، K (D) (dNTP) ، و K (pol) تم العثور عليها لتكون 0.19 نانومتر ، 22.64 ميكرو مولار ، و 24.99 نيوكليوتيدات (- 1) على التوالي. أظهر الإنزيم نشاطًا كبيرًا في النسخ العكسي (RT) مع Mn (2+) ، ولكن نشاط RT قليل جدًا مع Mg (2+). تم العثور على معدل الخطأ الخاص به 2.5 × 10 (-5) وهو مشابه لمعدل الخطأ المبلغ عنه سابقًا لبوليميراز E. Y721F).


5'-3 'نوكلياز خارجي

نشاط نوكلياز خارجي 5'-3 هو المكون النشط الوحيد لجزء N-terminus من DNA Polymerase I. والواجب الرئيسي لنشاط 5'-3 'خارجي نوكلياز هو إزالة بادئات RNA في الأطراف 5' من توليفها حديثًا DNA بحيث يمكن لنشاط البوليميراز أن يملأ الفجوات الناتجة.

من المهم أيضًا ملاحظة أن DNA Polymerase I هو الوحيد بكتريا قولونية بوليميراز الحمض النووي الذي يحتوي على موقع نشط نوكلياز خارجي 5'-3. كلاهما بول. الثاني وبول. يمكن ل III بلمرة الحمض النووي واستئصال شظايا في اتجاه 3'-5 '، ولكن لا أحد منهما قادر على هذه الوظيفة.

جزء N-terminus هو جزء أصغر بكثير من جزء Klenow. في الواقع ، تشكل المخلفات 1-323 ، بينما تشكل البقايا 324-928 القسم الأكبر (10). يمكن للبروتياز مثل سببيلين والتربسين أن يشق البول. أنا في هاتين الشظيتين. وهكذا ، على الرغم من حقيقة أننا نناقش بشكل عام Pol. وفقًا لشظايا مختلفة ، فإنه مع ذلك هو إنزيم ذو وحدة فرعية واحدة مع ثلاثة أنشطة مختلفة. بول. III ، من ناحية أخرى ، يحتوي على لب يتكون من 7 وحدات فرعية تعمل كجزء من إنزيم معقد متعدد الوحدات ، Pol. III holoenzyme ، والذي يتكون من 10 على الأقل أنواع عدد الوحدات الفرعية (9).

يوجد أدناه مثال على نشاط نوكلياز خارجي 5'-3 '. بشكل عام ، يستأصل أوليغومرات قصيرة بين 1 و 10 نيوكليوتيدات طويلة:

الشكل 2: هذا مخطط أساسي ضبابي بلا مبرر لنشاط نوكلياز خارجي في اتجاه 5'-3 '. يتم تقصير خيوط الحمض النووي عن طريق إزالة النيوكليوتيدات من الطرف الخامس للجزيء. على الأقل إنه ملون.


الدور الفسيولوجي لبوليميراز الحمض النووي 1

على الرغم من أن دراسات بوليميريز الدنا الأول قد قدمت الكثير من المعلومات حول آلية تخليق الحمض النووي ، فقد أظهر التحليل الجيني أن وظيفة البلمرة لهذا الإنزيم ليست مطلوبة لتكرار الحمض النووي. يتم ترميز DNA polymerase I بواسطة بولاالجين فيها بكتريا قولونية.ومع ذلك ، لا يوجد أليل متحور لـ بولاتم عزله في شاشات للطفرات الشرطية المعيبة في تكرار الحمض النووي. الحجة الأكثر إقناعًا بأن هذا البوليميراز غير مطلوب للتكرار جاء من فحص الآلاف من E. القولونيةالمسوخ ، مقايستهم لنشاط DNA polymerase I. متحولة بولا تم عزل السلالة (الشكل 5.16). يسمى هذا الأليل المتحور polA1، يحتوي على كودون هراء ، مما يؤدي إلى الإنهاء المبكر لتركيب البولي ببتيد المنتج وبالتالي فقدان وظيفة البوليميراز. ومع ذلك ، نمت السلالة الطافرة بمعدل طبيعي ، مما يدل على أن DNA polymerase I هو ليسمطلوب لتخليق الحمض النووي. النمط الظاهري الأكثر لفتا للانتباه polA1متحولة كانت قدرتها المنخفضة بشدة على إصلاح تلف الحمض النووي. أدى مزيد من التحقيق إلى عزل الأليلات المميتة المشروطة من بولاالجين. إن بروتينات DNA polymerase I الطافرة المشفرة بواسطة هذه الأليلات القاتلة الشرطية معيبة في نشاط نوكلياز خارجي من 5 إلى 3 ، مما يدل على أن هذا النشاط مطلوب من أجل بقاء الخلية. يزيل نشاط نوكلياز 5 'إلى 3' اشعال RNA أثناء تخليق الخيط المتأخر عند شوكة النسخ المتماثل ، ويستخدم في إصلاح الحمض النووي.

الشكل 5.16. مقتطفات من أ polA1 سلالة متحولة معيبة في نشاط بوليميراز الحمض النووي. بلمرة الحمض النووي في مقتطفات من E. القولونيةتم قياس الخلايا من خلال دمج dTTP المشع في الحمض النووي. أظهرت سلالة النوع البري (الخط المسمى W) نشاطًا عاليًا. تم فحص المسوخات من هذه السلالة بشكل منهجي لفقدان نشاط بلمرة الحمض النووي ، وتم العثور على واحد (الخط المسمى P لاحظ التغيير في المقياس من اللوحة العلوية). تحتوي هذه السلالة المتحولة على أقل من 1٪ من نشاط النوع البري ، كما يتضح من خلط جزء واحد من مستخلص من النوع البري مع 99 جزءًا من مستخلص متحولة (تظهر نتائج التخفيف بمقدار 100 ضعف كخط PW). تم تعيين الطفرة ل بولا، الذي يشفر DNA polymerase I. تنمو السلالة المتحولة مثل النوع البري ، مما يدل على أن DNA polymerase I ليس مطلوبًا لتكرار الحمض النووي. هذا الرقم مأخوذ من De Lucia and Cairns (1969) Nature 224: 1164-1166.

إن بوليميراز الدنا الثالث عبارة عن بوليميراز معالج للغاية ومتضاعف

الاستنتاج القائل بأن DNA polymerase I ليس البلمرة التكراري لـ E. القولونيةأدى إلى السؤال الواضح حول ماهية الإنزيم المستخدم بالفعل أثناء النسخ المتماثل. أدى التحقيق في الجينات المعزولة في شاشات بحثًا عن طفرات ناقصة مشروطًا في النسخ المتماثل إلى الإجابة. إن البوليميراز المتكاثر في E. القولونيةهو DNA polymerase III.

إن بوليميراز الحمض النووي I أكثر وفرة من البوليميرات الأخرى في E. القولونيةويخفي نشاطهم. وبالتالي استنفاد نشاط DNA polymerase I في polA1وفرت الخلايا المتحولة (الشكل 5.17) الفرصة لمراقبة بوليميرات الحمض النووي الأخرى. تم عزل بوليميرات الحمض النووي الثاني والثالث من مقتطفات من polA1الخلايا ، المسماة بترتيب اكتشافها.

بوليميريز الحمض النووي IIهي سلسلة عديد ببتيد واحدة وظيفتها غير مؤكدة. السلالات التي تحتوي على جين متحور لـ DNA polymerase II (بولب 1) لا يظهر أي خلل في النمو أو التضاعف. ومع ذلك ، فإن نشاط DNA polymerase II يزداد أثناء الإصلاح المستحث للحمض النووي ، وقد يعمل على تخليق DNA مقابل قاعدة محذوفة على حبلا القالب.

تظهر الأدلة الجينية ذلك بوضوح بوليميريز الحمض النووي ثالثايستخدم لتكرار بكتريا قولونية كروموسوم. يتكون هذا الإنزيم من عدة وحدات فرعية متعددة الببتيد. تم تحديد العديد من الجينات التي تشفر هذه الوحدات الفرعية متعددة الببتيد في شاشات للطفرات القاتلة الشرطية المعيبة في تكرار الحمض النووي. فقدان وظيفة هذه الحمض النوويتمنع الجينات التكرار ، مما يدل على أن منتجاتها مطلوبة للتكرار.


بوليميراز الحمض النووي

الإنزيمات التي تحفز تخليق الحمض النووي على قالب الحمض النووي هي بوليميراز الحمض النووي. يؤدون وظيفتين أساسيتين في الخلية: تخليق الحمض النووي أثناء تكرار الجينوم ، وإعادة تخليق الحمض النووي المفقود بعد تلف إعادة التركيب ، وبعد استئصال التمهيدي من الشريط المتأخر.

في كل من بدائيات النوى وحقيقيات النوى ، تُخصص بوليميرات الحمض النووي المتخصصة لوظائف النسخ والإصلاح ، ويُطلق على الأولى أحيانًا نسخ الحمض النووي. تمتلك جميع بوليميرات الحمض النووي أ 5 & ​​# 8242- & GT3 & # 8242 بوليميراز نشاط. و التحلل الفسفوري النشاط ، الذي يسهل معًا تخليق الحمض النووي.


بوليميراز DNA بدائية النواة

في بدائيات النوى ، DNA pol-I و II و III هي الأنواع الثلاثة المهمة التي سنناقشها أدناه.

بوليميريز الحمض النووي أنا

إنه أول إنزيم بوليميراز ، اكتشفه آرثر كورنبرغ في عام 1958. ويتكون من سلسلة واحدة متعددة الببتيد. في البداية ، كان يعتقد أن DNA pol-I هو إنزيم تكرار. في دراسة أخرى ، ثبت أنه إنزيم لإصلاح الحمض النووي أكثر من إنزيم النسخ المتماثل. في pol-I ، توجد ذرة واحدة من الزنك في كل سلسلة ، والتي تُعرف أيضًا باسم "الإنزيمات الفلزية”.

أنشطة DNA pol-I: يُظهر كلاً من البوليميراز وكذلك نشاط نوكلياز خارجي.

  • 5’-3 ’نشاط البلمرة يتضمن إضافة قواعد النوكليوتيدات لتركيب خيط DNA جديد.
  • 3’-5 ’نشاط نوكلياز خارجي يتضمن حذف قواعد النوكليوتيدات غير المتطابقة أو يساعد في ترجمة نيك.
  • 5’-3 ’نشاط نوكلياز خارجي يتضمن حذف بادئات الحمض النووي الريبي من الجزء الخامس من خيط DNA التكميلي.

بنية: هيكل Pol-I يشبه اليد اليمنى للإنسان. يتكون الهيكل من المناطق الثلاث التالية:

  • منطقة النخيل: هو الموقع النشط الحفزي الذي يمتلك تسلسلات محفوظة. إنه بمثابة موقع نشط لـ pol-I. منطقة النخيل مصنوعة من صفائح مطوية. وتتمثل وظيفتها الأساسية في معالجة إضافة ثلاثي فوسفات الديوكسي ريبونوكليوتيد.
  • منطقة الاصبع: إنه موقع القالب ، حيث بمجرد الانتهاء من الاقتران الأساسي فإنه يرفق ثلاثي فوسفات الديوكسي ريبونوكليوتيد. وتتمثل وظيفتها الأساسية في تحفيز تخليق النيوكليوتيدات الواردة بمساعدة محفز يعرف باسم أيونات المعادن.
  • منطقة الإبهام: هي المنطقة التي تربط الحمض النووي وتحافظ على الموضع الصحيح للبرايمر والموقع النشط.


بوليميريز DNA II

اكتشفه توماس كورنبرغ في عام 1970. وكفاءته في البلمرة أبطأ من pol-I. يتكون أيضًا من سلسلة عديد ببتيد واحدة. Pol-II بمثابة انزيم احتياطي أو بديل لعملية التكرار ، لأنه في حالة عدم وجود pol-I يمكن أن يطيل شظايا Okazaki.

أنشطة DNA pol-II:

  • 5'-3 'نشاط البلمرة يتضمن إضافة قواعد النوكليوتيدات لتركيب خيط DNA جديد.
  • 3’-5 ’نوكلياز خارجي يتضمن حذف قواعد النوكليوتيدات غير المتطابقة أو يساعد في ترجمة نيك.

بنية: هيكل pol-II غير معروف تمامًا.

بوليميريز الحمض النووي الثالث

إنه الإنزيم الأساسي الذي يشارك بشكل أساسي في عملية النسخ المتماثل. يتكون من سلسلتين عديد الببتيد. يحتوي Pol-III على وحدة فرعية من العديد من الإنزيمات التي تؤدي وظائف مختلفة ، وتسمى أيضًا "إنزيم غير متجانس". يحتوي Pol-III على 10 وحدات فرعية في بنيته تجعل من pol-III إنزيمًا كاملاً ، أي "holoenzyme".

الأنشطة الموجودة في DNA pol-III:

  • 5’-3 ’نشاط البلمرة يتضمن إضافة قواعد النوكليوتيدات لتركيب خيط DNA جديد.
  • 3’-5 ’نوكلياز خارجي يتضمن حذف قواعد النوكليوتيدات غير المتطابقة أو يساعد في ترجمة نيك.

بنية: يتكون هيكل pol-III من 10 وحدات فرعية ، مثل:

  • α: يشفر جين DNA E ويساعد في تخليق الحمض النووي.
  • Ɛ: رموز لجين DNA Q وتساعد في نشاط التدقيق اللغوي 3’-5.
  • Ɵ: يشفر جين hol E ، ويعمل كبروتين ملحق ويشارك أيضًا في آلية التدقيق اللغوي.
  • Ʈ: يرمز لجين DNA X ويعزز إضعاف مركب البروتين الأساسي.
  • Ƴ: يرمز لجين DNA Y.
  • δ: يشفر الجين A.
  • δ ': رموز لجين هول ب.
  • χ: لتشفير جين هول سي.
  • Ψ: رموز لجين هول د.
  • β: يشفر الجين DNA N. إنه بمثابة بروتين المشبك الذي يحمل جزيء الحمض النووي والمسؤول عن عامل التصنيع. Ƴ و δ و δ 'و χ و كلها تعمل كمركب محمل مشابك وتساعد β- بروتين محمل المشبك على الارتباط بالحمض النووي.

مخطط المقارنة بين وظائف بدائية النواة DNA Polymerases

الخصائصDNA pol-IDNA pol- IIDNA pol-III
5'-3 'نشاط البلمرةالحاليالحاليالحالي
3’-5 ’نوكلياز خارجيالحاليالحاليالحالي
5’-3 ’نشاط نوكلياز خارجيالحاليغائبغائب
البلمرة المعتمدة على الحمض النووي الريبييمكن أن تنفذ البلمرة المعتمدة على الحمض النووي الريبيلا تستطيعلا تستطيع
خصائص إصلاح الحمض النوويالحاليالحاليغائب
خاصية الربطالحاليغائبغائب
المشاركة في التكراريشارك لا تشاركيلعب دورًا رئيسيًا

مميزات

يحتوي DNA- polymerase على بعض الخصائص المحددة مثل:

  1. نشاط البلمرة
  2. الاخلاص، أي القدرة على التصحيح اللغوي
  3. العملية، أي معالجة الحمض النووي وأسسه
  4. ثبات الحرارة، أي الاستقرار عند درجة حرارة عالية
    مثال: Taq- DNA polymerase of ترمس البكتيريا المائية.

كل هذه الخصائص تجعلها مفيدة في التقنيات الجزيئية مثل PCR وتسلسل الحمض النووي وما إلى ذلك.


بوليميريز الحمض النووي أنا

& ltp> توفر درجة التعليق التوضيحي مقياسًا إرشاديًا لمحتوى التعليق التوضيحي لإدخال أو بروتيوم UniProtKB. هذه الدرجة & ltstrong> لا يمكن & lt / strong> استخدامها كمقياس لدقة التعليق التوضيحي حيث لا يمكننا تحديد "التعليق التوضيحي الصحيح" لأي بروتين معين. & ltp> & lta href = '/ help / annotation_score' target = '_ top'> أكثر. & lt / a> & lt / p> - دليل تجريبي على مستوى البروتين i & ltp> يشير هذا إلى نوع الدليل الذي يدعم وجود البروتين. لاحظ أن دليل "وجود البروتين" لا يعطي معلومات عن دقة أو صحة التسلسل (التسلسلات) المعروضة. & ltp> & lta href = '/ help / protein_existance' target = '_ top'> المزيد. & lt / a> & lt / p>

حدد قسم على اليسار لرؤية المحتوى.


شاهد الفيديو: Репликация ДНК (أغسطس 2022).